オリゴヌクレオチド標識抗体TotalSeq™-Dを用いて単一細胞における遺伝子解析とタンパク質の検出を組み合わせることで、遺伝子型から表現型までの複雑な問題を明らかにしましょう。1細胞シーケンシングは、従来のバルクシーケンシングでは難しかった点、例えば、感度を高めて不均一なサンプル中の異なる遺伝子型を分析することが可能です。これは、がんなどの複雑な疾患を理解するために重要です。タンパク質発現の検出を加えることで、さらに多くの情報を取得でき、次のようなことが可能となります。

• 免疫表現型を同時に解析することで、遺伝子型の変異が特定の細胞の種類や状態に関連しているかどうかを調べることができます
• 新規のターゲット発見にも活用できます
• 一塩基変異（SNV）や挿入・欠失変異（Indel）、コピー数変異（CNV）とタンパク質を同時に検出することで、遺伝子型と表現型を関連付けることができます

Mission Bio社のTapestriプラットフォームにBioLegendのTotalSeq™-D抗体を組み合わせて、不均一なサンプルにおける遺伝子変異を明らかにし、その変異とタンパク質発現の関連を調べましょう。

DNAとタンパク質解析のための単一細胞プロテオゲノミクス

抗体による染色は、既存のMission Bio社のワークフローに円滑に組み入れることができます。

サンプルをTotalSeq™-D抗体と反応させる

Mission Bio社のTapestriプラットフォーム
で1細胞ずつ区分する

細胞を溶解し、DNAをクロマチンから遊離させる

細胞バーコードを付加する

ターゲットを増幅し、ライブラリーを作製する

シーケンシングを行い、解析する

TotalSeq™-D製品について詳しく見てみましょう

TotalSeq™-D抗体は、Mission Bio社のTapestriプラットフォームに使用できるよう設計されています。それぞれの抗体は、捕捉配列、クローン特異的な抗体バーコード配列、PCRハンドルを含むオリゴヌクレオチドが標識されています。PCRハンドルはMission Bio社の細胞バーコードおよびプライマーと組み合わせて使用されます。TotalSeq™-D製品はイルミナ社のシーケンシングプラットフォームに対応しています。
 

使用例

2名のドナー由来のPBMCを混合し、TotalSeq™-D抗体と反応させた後、Mission Bio社のTapestriプラットフォームで処理しました。ヒートマップで視覚化することにより、何千もの細胞にわたって同一細胞から遺伝子型とタンパク質発現のデータを同時に取得できることが分かります。

ヒトPBMCをTotalSeq™-D Heme Oncology Cocktail v1.0と反応させ、Mission Bio社のTapestri DNA and Protein workflowを用いて処理しました。タンパク質のカウントデータを変換し、タンパク質の発現レベルを重ね合わせてUMAPで視覚化しました。クラスターはタンパク質発現のみに基づいて識別しました。

Single-Cell Proteogenomics to Analyze DNA and Protein

Antibody staining fits seamlessly into the existing Mission Bio workflow.

Stain Sample with TotalSeq-D Antibodies

Cell Encapsulation on
Mission Bio’s
Tapestri Platform

DNA and Protein Release

Cell Barcoding

Target Amplification and Library Prep

Sequence and Analysis

Discover TotalSeq-D Reagents

The TotalSeq-D line of reagents is constructed for compatibility with the Mission Bio Tapestri platform. Each antibody is conjugated to an oligonucleotide that consists of a capture sequence, clone-specific barcode sequence, and a PCR handle. The PCR handle is used as a priming template for Mission Bio-associated cell barcoding and primer oligonucleotides. TotalSeq-D reagents are compatible with Illumina® sequencing platforms.

We offer both single TotalSeq-D antibody conjugates as well as our TotalSeq-D Human Heme Oncology Cocktail v1.0. The Heme Oncology Cocktail contains 42 primary antibodies and 3 isotype control antibodies. Each antibody has been pre-titrated for optimal performance and the cocktail is provided in convenient, single-use tubes. See representative data below for this panel.

Mission Bio has developed the TotalSeq-D scMRD AML Antibody Cocktail using TotalSeq-D antibodies. This panel is sold and fully supported by Mission Bio for use with the Tapestri Single-cell Measurable Residual Disease (scMRD) Multi-omics Assay. For more information regarding this assay and the TotalSeq-D scMRD AML Antibody Cocktail please contact Mission Bio.

Representative Data

PBMCs from two donor samples were mixed together, stained with TotalSeq-D antibodies and run on Mission Bio's Tapestri platform. Heatmap visualization reveals the power to obtain genotype and phenotype from the same cells across thousands of cells.

Human PBMCs were stained with the TotalSeq-D Heme Oncology Cocktail v1.0 and processed using the Mission Bio Tapestri DNA and Protein workflow. Protein count data were transformed and visualized in a UMAP projection overlaid with protein. Clusters were identified based on protein expression only.

Buyer is solely responsible for determining whether Buyer has all intellectual property rights that are necessary for Buyer's intended uses of the BioLegend TotalSeq products. For example, for any technology platform Buyer uses with TotalSeq, it is Buyer's sole responsibility to determine whether it has all necessary third party intellectual property rights to use that platform and TotalSeq with that platform.